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細胞培養超純水的重要性

細胞培養行業的用水污染源有著多種多樣的因素,如細菌、霉菌、酵母等。這些污染物通常都在肉眼可見的范圍內,或是光學顯微鏡下能夠看見的。然而化學來源以及污染源頭都是其他的生物媒介進行影響同時也在培養過程中影響細胞生長以及形態方面,但是這些無法被裸眼觀察出來,因此細胞培養用水中不含微生物、內毒素、無機離子以及各類有機復合物等方面都無法觀察到。

本實驗的目的是為了評估艾柯純水系統生產的超純水是否能夠安全無恙地輕松用于細胞培養應用。在本研究中,我們以即用型培養基來培養細胞作為對照,同時分別用純水處理設備生產廠家生產出來的水(UF水)和RO水來配制粉末培養基。在本應用指南中所使用的RO水數據是通過新一代系統的舊款模型而獲得的。每個培養批次的結果用于評估由艾柯純水處理設備生產廠家系統生產的水是否適合用于細胞的培養。

本實驗中所使用的PER.C6細胞系來源于人成視網膜細胞,如今也應用于重組蛋白的表達和單克隆抗體(Mab生產)的制備,以及用于治療性蛋白和單克隆抗體的生產。

本實驗結果清楚地顯示了用UF水配制的粉末培養基市場上在售的即用型培養基更加適合細胞系的培養。細胞系在用UF水配制的培養基中培養后的生長特征與對照組中用即用型培養基培養后的特征相似。此外,我們還觀察到當實驗在中進行時,細胞系樣品在用UF水配制的培養基中培養與用RO水配制的培養基中培養相比,細胞生長更加良好。在這項實驗中,細胞密度基本都變得很高,而O2不再是限制性因素。因此我們得出結論,RO水中因為有更高濃度的內毒素或無機鹽,因此影響了細胞生長。

這些實驗結果都通過在中培養細胞系而獲得的單抗產量得到進一步驗證與體現。細胞系在用實驗室超純水配制的培養基樣品中培養能夠獲得最高的單抗產量,對照組(使用即用型培養基)的產量稍低。這兩種情況的單抗產量都不同于RO水樣品,在RO水樣品中培養后單抗產量反而下降。

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